基因表达
目前本实验室主要采用的原核表达系统的表达载体为pET载体系列与pGEX载体系列,表达菌株为BL21(DE3)系列菌株和Rosseta系列菌株,如有特殊需要,我们还单独可以提供特殊菌株与载体。
宿主菌TG1、XL-Blue1,辅助质粒VCSM13
提供噬菌体展示系统(宿主菌TG1、XL-Blue1,辅助质粒VCSM13、M13K07,噬菌粒载体pCANTAB5E、pComb3);
稳定表达细胞株构建
百恩维有着多年构建稳转细胞株的经验,已在H1299、THP-1、MCF7/ADR、A549、V79、MC3T3-E1、CHO、SiHa、3D4/2等多个种属细胞中成功构建过表达和RNAi稳转细胞株。
DNA甲基化检测技术
在基于Bisulfite转化的DNA甲基化检测方法中,引物是决定实验成败的关键性因素,且视期望检测的目的基因片段的不同,适宜引物的存在与否有较大的不确定性,请尽量采用其可行性经过验证的引物,如因引物等
构建MTB突变菌株(基因敲除法)
采用噬菌体介导的同源重组进行基因敲除:首先构建同源交换位点(AES),随后将其整合到结核分枝杆菌噬菌体基因组,获得噬菌粒(phasmid);将噬菌粒导入耻垢分枝杆菌,获得整合有同源交换位点的重组噬菌体,经体外扩增获得高滴度的重组噬菌体,对结核分枝杆菌进行转染;
诱导多能干细胞
利用病毒载体将四个转录因子(Oct4, Sox2, Klf4 和c-Myc)的组合转入分化的体细胞中,使其重编程而得到的类似胚胎干细胞的一种细胞类型。